三葉虫は生痕化石（クルジアナ［Ｃｒｕｓｉａｎａ］として知られています。）や顎（節足動物の顎というのは肢が変形したものです。）を持たないなどの物証により一般にデトリタス食（海底表層に堆積した有機物を漁る食性。）と考えられています。が、腐食性（死体を食べる）の種や捕食性の種類もいた可能性もあります。（三葉虫が残したとおもわれる捕食跡？の生痕化石もみつかっています。）
三葉虫の性生活（生殖等）については、彼らがおそらく卵生であったこと以外、今のところ皆目分かっていません。（館長がしらないだけ？）もしなにかご存じの方は連絡ください。
人生（虫生？！）山あり谷あり、味方もあれば敵もある〜う♪、てな訳で彼ら三葉虫にも多くの敵（捕食者）が存在したようです。カンブリア紀のアノマロカリス類や、オルドヴィス紀ごろより台頭しはじめた頭足類（オウムガイ）、魚など多種様々な敵から逃れるため、丸まって体の軟体部を防御したり（多くの三葉虫が採用した防御法でenrollmentと呼ばれています。）、砂の中に隠れて目だけ潜望鏡のように出して様子をうかがったり、毒を出して防御した（のかもしれない）種もいたようです。